RNase抑制剂(RNase Inhibitor)使用说明书
(产品货号:EM110)
描述 :本产品为重组表达得到的酶抑制剂,可与RNase非共价结合,形成1:1的复合物,具有广谱的RNase抑制活性。尿素及巯基类试剂可以解离本品与RNase形成的复合物,使 RNase复活而 RNase Inhibitor不可逆失活,因此反应体系中避免尿素及巯基类试剂存在。
产品规格与包装
货号 |
规格 |
浓度 |
数量 |
体积 |
EM110 |
2,000U |
40 U/μl |
1管 |
50μl |
20,000U |
40 U/μl |
1管 |
500μl |
酶活定义
抑制5 ng RNase A 的50%活性所需的RNase Inhibitor量定义为一个活性单位。
应用
cDNA合成反应;体外无细胞系统转录或翻译;提高多聚核糖体的产量和活性
储存
-20℃,可保存 2年。
使用方法
1. 按以下组分配制反应体系
组分 |
每管加样量/μl |
M-MLV逆转录酶 |
0.5-1.0 |
10x RT Buffer |
2 |
dNTP (10 mM each) |
1 |
Total RNA or Poly(A) RNA |
0.1-2 |
20×Oligo dT(25)&Random Primer |
1 |
RNase抑制剂 (40U/ul) |
0.5 |
RNase Free H2O |
Up to 20 |
注:Oligo dT(15)使用浓度为20-50μΜ,如使用Random9随机引物可使用125μΜ,基因特异性引物可使用5μΜ。
2. 按下列条件在PCR仪上进行逆转录反应条件设置
30℃ |
15分钟 |
55℃ |
30~60分钟 |
85℃ |
10分钟 |
4℃ |
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反转录所得cDNA可直接用于核酸扩增(检测)反应或下游实验。