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RNase抑制剂(RNase Inhibitor)使用说明书


先达基因 / 2021-01-05

 RNase抑制剂RNase Inhibitor)使用说明书

(产品货号:EM110

描述 :本产品为重组表达得到的酶抑制剂,可与RNase非共价结合,形成1:1的复合物,具有广谱的RNase抑制活性。尿素及巯基类试剂可以解离本品与RNase形成的复合物,使 RNase复活而 RNase Inhibitor不可逆失活,因此反应体系中避免尿素及巯基类试剂存在。

产品规格与包装

货号

规格

浓度

数量

体积

EM110

2,000U

40 U/μl

1管

50μl

20,000U

40 U/μl

1管

500μl

酶活定义

抑制5 ng RNase A 的50%活性所需的RNase Inhibitor量定义为一个活性单位。

 

应用

cDNA合成反应;体外无细胞系统转录或翻译;提高多聚核糖体的产量和活性

 

储存

 -20℃,可保存 2年。

 

使用方法

1. 按以下组分配制反应体系

组分

每管加样量/μl

M-MLV逆转录酶

0.5-1.0

10x RT Buffer

2

dNTP (10 mM each)

1

Total RNA or Poly(A) RNA

0.1-2

20×Oligo dT(25)&Random Primer

1

RNase抑制剂 (40U/ul)

0.5

RNase Free H2O

Up to 20

注:Oligo dT(15)使用浓度为20-50μΜ,如使用Random9随机引物可使用125μΜ,基因特异性引物可使用5μΜ。

2. 按下列条件在PCR仪上进行逆转录反应条件设置

30℃

15分钟

55℃

30~60分钟

85℃

10分钟

4℃

 

反转录所得cDNA可直接用于核酸扩增(检测)反应或下游实验。